La stabilité des anticorps dilués dépend de plusieurs facteurs. Le tampon de dilution devrait :
- Inhiber la croissance des microorganismes
- Stabiliser l’anticorps sur le plan microbiologique
- Empêcher la dégradation protéolytique de l’anticorps
- Eviter l’adhésion de l’anticorps à la paroi du tube et veiller à ce que la solution se répartisse de manière homogène sur la coupe du tissu.
Le tampon de dilution d’anticorps devrait par ailleurs réduire en grande partie le bruit de fond en immunohistochimie et rendre superflu l’étape de blocage supplémentaire avant l’incubation de l’anticorps primaire. Aussi, les tampons de dilution d’anticorps utilisés en immunohistochimie devraient être de couleur verte afin que la solution présente sur la lame ou dans les seringues pour automate soit facilement identifiable. Cela semble à priori banal, mais s’avère cependant être très important dans la pratique quotidienne.
Le système Zytomed vous délivre un diluant d’anticorps, qui répond à tous ces critères : Zytomed Systems Antibody Diluent.
Une astuce :
Les anticorps concentrés provenant de la plupart des producteurs sont, moyennant des agents de conservation, protégés sur le plan microbiologique, si bien qu’une dégénération par champignons, bactéries ou autres micro-organismes est improbable. La décomposition des anticorps par des protéases entraînées par inadvertance, entre plus fortement en ligne de compte.
Les anticorps sont certes préservés, la plupart du temps, de l’attaque des protéases par les prétendues protéines protectrices ou protéines de transport qui sont contenues dans la solution d’anticorps. Cette protection reste cependant limitée.
Pour cette raison, nous conseillons d’introduire exclusivement des pointes de pipettes parfaitement propres dans les tubes contenant les anticorps concentrés afin d’éviter l’entraînement de protéases. L’emploi de pointes stériles peut, à cette fin tout spécialement, s’avérer être profitable.
Lorsque vous diluez vos anticorps concentrés dans des conditions optimales, avec un tampon de dilution adéquat (ex. ZUC025 de Zytomed-Systems), vous obtenez ainsi des solutions d’anticorps prêtes à l’emploi, lesquelles restent stables durant plusieurs mois.
Vous vous épargnez la préparation fréquente des solutions d’anticorps prêts à l’emploi et évitez également, de ce fait, le pipetage de volumes minuscules de quelques microlitres et éviter également d’éventuelles contaminations liées au pipetage.
Quelques exemples d’anticorps concentrés dilués avec le diluant de Zytomed Systems, ZUC025 :
| Conditionnement | Référence | Fournisseur | Certification |
|---|---|---|---|
| 100 ml | ZUC025-100 |  |
IVD, CE |
| 500 ml | ZUC025-500 |  |
IVD, CE |